(武漢)為了在體外實(shí)驗(yàn)中,研究臍血CD3AK細(xì)胞培養(yǎng)上清液(cord blood CD3AK supernatant, CS)對(duì)HL-60細(xì)胞增殖、分化和凋亡的影響,研究者以不同濃度的CS(10% CS、15% CS、20% CS)作用于不同時(shí)間(3 d,6 d和9 d)的HL-60細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,應(yīng)用細(xì)胞計(jì)數(shù)法結(jié)合錐蟲(chóng)藍(lán)拒染法研究CS誘導(dǎo)的HL-60增殖情況。應(yīng)用流式細(xì)胞儀分析CS作用前后細(xì)胞周期及細(xì)胞表面分化標(biāo)志CD11b的變化,光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化,氯化硝基唑藍(lán)(NBT)還原實(shí)驗(yàn)研究細(xì)胞的NBT還原陽(yáng)性百分率,從而研究HL-60細(xì)胞的分化。應(yīng)用電子顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡,原位末端標(biāo)記法研究CS作用前后HL-60細(xì)胞的凋亡變化。結(jié)果隨CS作用時(shí)間的延長(zhǎng)和劑量的增加,細(xì)胞增殖速度逐漸減慢.細(xì)胞周期分析顯示,CS作用后G0期和G1期顯著增多,S期顯著減少,G2期和M期無(wú)明顯變化,說(shuō)明CS使細(xì)胞阻滯在G0和G1期。隨CS作用時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞體積逐漸增大,3 d后被誘導(dǎo)的細(xì)胞表面開(kāi)始表達(dá)分化標(biāo)志物CD11b并出現(xiàn)細(xì)胞核型變化,NBT陽(yáng)性細(xì)胞增多,隨CS濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng),這些變化越明顯。20% CS誘導(dǎo)72 h后,被誘導(dǎo)的細(xì)胞出現(xiàn)凋亡,隨誘導(dǎo)時(shí)間延長(zhǎng),凋亡細(xì)胞增多。可見(jiàn) CS能抑制HL-60細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞分化和凋亡。/**/