(武漢)為了研究pU-VEGF-siRNA對(duì)惡性黑素瘤成瘤和凋亡的影響及其機(jī)制。研究者構(gòu)建針對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的發(fā)卡樣siRNA真核表達(dá)載體pU-VEGF-siRNA,通過(guò)電穿孔法將構(gòu)建重組體導(dǎo)入人惡性黑素瘤細(xì)胞系A(chǔ)375,并建立pU-VEGF-siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞荷瘤裸鼠模型,應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)荷瘤裸鼠腫瘤組織VEGF和血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性Ⅷ因子相關(guān)抗原(FⅧRAg)的表達(dá),依據(jù)FⅧRAg的表達(dá)評(píng)價(jià)腫瘤微血管密度,末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記法(TUNEL)定量檢測(cè)荷瘤裸鼠模型的腫瘤組織凋亡。結(jié)果體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明,實(shí)驗(yàn)組成瘤率明顯低于對(duì)照組,且其腫瘤生長(zhǎng)速度也明顯減慢(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)組VEGF表達(dá)和腫瘤微血管密度明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)組可見(jiàn)大量凋亡細(xì)胞,對(duì)照組僅見(jiàn)少許凋亡細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組凋亡指數(shù)與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。可見(jiàn)通過(guò)RNA干擾技術(shù)阻斷VEGF的表達(dá),在裸鼠體內(nèi)可顯著抑制惡性黑素瘤生長(zhǎng)。 /**/