（上海）為了優(yōu)化培養(yǎng)條件，獲得體外克隆化培養(yǎng)的成年大鼠骨髓多能成體祖細(xì)胞(rMAPC)，并對(duì)其進(jìn)行表型分析及分化潛能鑒定。研究者選擇低血清條件培養(yǎng)基全骨髓直接貼壁法初步分離大鼠骨髓干細(xì)胞，用極限稀釋法進(jìn)行克隆化培養(yǎng),用流式細(xì)胞術(shù)及免疫細(xì)胞化學(xué)法對(duì)克隆化培養(yǎng)的rMAPC進(jìn)行表型分析，并進(jìn)行體外成脂肪、成骨及成神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)，RT-PCR檢測(cè)Oct 4及三個(gè)胚層早期標(biāo)志物，確定其表型及分化潛能。結(jié)果單個(gè)細(xì)胞來(lái)源rMAPC在體外擴(kuò)增至20代仍保持良好的生長(zhǎng)狀態(tài)；流式細(xì)胞術(shù)及細(xì)胞免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示CD71、α-SMA及Vimentin表達(dá)陽(yáng)性；CD34、CD44、CD45表達(dá)陰性；細(xì)胞周期分析顯示S+G2+M期細(xì)胞約占17%，而處于G0/G1期的細(xì)胞占83%；rMAPC體外可被誘導(dǎo)向脂肪細(xì)胞、骨細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞分化；RT-PCR檢測(cè)到Oct 4及三個(gè)胚層早期標(biāo)志物的表達(dá)?？梢?jiàn)體外克隆化培養(yǎng)的rMAPC能維持良好的干細(xì)胞生物學(xué)特性。 /**/