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β1/β2腎上腺素能受體基因缺失對(duì)腎臟球旁器顆粒細(xì)胞腎素分泌

【?2008-06-02 發(fā)布?】 臨床報(bào)道  

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    該項(xiàng)研究目的是觀察β腎上腺素能受體對(duì)腎臟球旁器顆粒(JG)細(xì)胞腎素分泌的調(diào)節(jié)作用。方法采用密度梯度離心原代分離野生型和131/132腎上腺素受體基因敲除小鼠腎小球球旁器(JGA)顆粒細(xì)胞(JGC)。實(shí)時(shí)PCR明確JG細(xì)胞上存在β1/β2腎上腺素能受體基因表達(dá)。激光共聚焦顯微鏡下動(dòng)態(tài)觀察喹林和LysoTracker-Red染色條件下異丙腎上腺素促使JG活細(xì)胞分泌腎素的動(dòng)態(tài)過程。尾靜脈取血,用放射免疫方法測定清醒狀態(tài)野生型和β1/β2腎上腺素能受體基因敲除小鼠基礎(chǔ)腎素水平。不同濃度前列腺素E2(PGE2)、異丙腎上腺素和福斯高林刺激野生型和β1/β2腎上腺素能受體基因缺失小鼠JG細(xì)胞,放免法測定細(xì)胞內(nèi)和上清中腎素活性。實(shí)時(shí)PCR測定腎皮質(zhì)及JG細(xì)胞中腎素mRNA水平,以及不同濃度福斯高林對(duì)JG細(xì)胞內(nèi)cAMP濃度的影響。結(jié)果成功分離的JG細(xì)胞上存在13腎上腺素能受體基因表達(dá)。激光共聚焦顯微鏡能觀察到異丙腎上腺素明顯刺激JG細(xì)胞分泌包含腎素的酸性顆粒。β1/β2腎上腺素能受體基因敲除小鼠血漿基礎(chǔ)腎素降低,與腎臟皮質(zhì)腎素mRNA降低平行。原代培養(yǎng)的β1/β2腎上腺素能受體基因敲除小鼠的JG細(xì)胞,腎素產(chǎn)生和分泌都明顯降低,腎素mRNA也降低。PGE2、異丙腎上腺素和福斯高林呈劑量依賴性增加野生型小鼠JG細(xì)胞腎素轉(zhuǎn)錄、合成和分泌。β1/β2腎上腺素能受體基因敲除小鼠JG細(xì)胞對(duì)13腎上腺素能受體激動(dòng)劑沒有反應(yīng),而大劑量福斯高林能刺激其腎素分泌。福斯高林呈劑量依賴性上調(diào)JG細(xì)胞內(nèi)cAMP水平。由此得出結(jié)論JG細(xì)胞上存在的腎上腺素能β受體,通過上調(diào)JG細(xì)胞內(nèi)cAMP,促使JG細(xì)胞合成和分泌腎素。/**/
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