該項(xiàng)研究目的是探討CpG寡脫氧核苷酸(CpG-ODN)增強(qiáng)小鼠體內(nèi)結(jié)核分枝桿菌清除能力的可能機(jī)制。方法采用將雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為免疫組36只和對(duì)照組24只,并分別腹腔注射CpG-ODN30μg(溶于200Ixl生理鹽水)和200山生理鹽水。2周后每只小鼠經(jīng)尾靜脈注射結(jié)核分枝桿菌H37Rv1×10^6CFU。感染后3周和4周每組分別處死12只小鼠,免疫組小鼠飼養(yǎng)至感染后6周處死。
肺和脾組織進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),觀察肺和脾組織的病理學(xué)變化。用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)方法檢測(cè)肺和脾組織γ-干擾素、白細(xì)胞介素(IL)-4、IL-10、IL-12、IL-18和誘導(dǎo)型-氧化氮合酶(iNOS)mRNA表達(dá)的相對(duì)含量。組間比較采用t檢驗(yàn)。結(jié)果感染后3周,免疫組小鼠的肺和脾組織經(jīng)培養(yǎng)后無結(jié)核分枝桿菌生長(zhǎng)。感染后4周,免疫組小鼠的肺和脾組織培養(yǎng)后有結(jié)核分枝桿菌生長(zhǎng),但明顯少于對(duì)照組;肺組織中IL-18、γ-干擾素和iNOS的mRNA表達(dá)的相對(duì)含量分別為(3.6±0.5、0.32±0.14和23.2±4.7),均明顯高于對(duì)照組的(1.6±1.1、0.20±0.10和16.24±5.1),IL-12p40mRNA表達(dá)的相對(duì)含量(5.7±0.6)明顯低于對(duì)照組(14.5±1.9),IL-4和IL-10mRNA表達(dá)的相對(duì)含量(0.30±0.09和0.28±0.05)與對(duì)照組(0.26±0.05和0.29±0.08)無明顯差別;脾組織中IL.18、γ-干擾素和iNOSmRNA表達(dá)的相對(duì)含量(5.5±1.3、0.52±0.07和9.14-1.8)明顯高于對(duì)照組(0.8±0.4、0.21±0.06和6.0±1.4),IL-12p40、IL4和IL-10mRNA表達(dá)的相對(duì)含量(2.1±0.3、0.23±0.10和0.10±0.04)明顯低于對(duì)照組(5.14±0.4、1.21±0.26和0.57±0.13)。與感染后4周比較,免疫組小鼠感染后6周,肺組織γ-干擾素mRNA表達(dá)的相對(duì)含量(0.95±0.27)明顯增高,IL-18、IL-4和IL-10mRNA表達(dá)的相對(duì)含量(3.514±0.86、0.45±0.35和0.24±0.21)無明顯變化,IL-12p40和iNOSmRNA表達(dá)的相對(duì)含量(1.72±1.41和1.1±0.5)明顯降低;脾組織IL-12p40和IL-18mRNA表達(dá)的相對(duì)含量(0.08±0.02)和(0.11±0.03)明顯降低,IL-10mRNA表達(dá)的相對(duì)含量(0.39±0.11)明顯增高,γ-干擾素、IL-4和iNOSmRNA表達(dá)的相對(duì)含量(0.63±0.32、0.304±0.16和8.4±2.7)無明顯變化。由此得出結(jié)論CpG-ODN增強(qiáng)小鼠清除體內(nèi)結(jié)核分枝桿菌的能力與IL-18、γ-干擾素和iNOS的表達(dá)增強(qiáng)及IL-4和IL-10的表達(dá)抑制密切相關(guān)。
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