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乙肝病毒聚合酶YMDD基序野生型和突變型在拉米夫定治療過程中的演化

【?2004-01-01 發(fā)布?】　臨床報道  

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長期采用拉米夫定治療慢性乙肝病毒（HBV）感染能夠誘發(fā)出現(xiàn)拉米夫定耐藥性HBV YMDD突變株。為進(jìn)一步研究，上海第二醫(yī)科大學(xué)的Xinxin Zhang博士及其同事觀察了拉米夫定治療前后YMDD野生型和突變株的克隆演化，并分析其臨床意義。

科研人員選取5例采用拉米夫定治療的慢性HBV感染者，采集他們的10份血清標(biāo)本（5份治療前、5份治療48周后）進(jìn)行研究。通過聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增后，對側(cè)翼有YMDD基序的部分HBV聚合酶基因進(jìn)行測序。同時，從每份標(biāo)本中隨機(jī)選擇20-24份克隆，利用該實驗室建立的實時熒光測定PCR方法檢測YMDD野生型和突變株。

直接對PCR產(chǎn)物測序發(fā)現(xiàn)，全部5例患者在治療前均無YMDD突變、4例患者在治療48周后出現(xiàn)YMDD突變。分析單一克隆顯示，每例患者在治療前的突變株發(fā)生率分別為0、9.5%、0、4.5%、5.6%，治療48周后分別為100%、100%、65%、100%、0%。1例患者在治療前發(fā)現(xiàn)M552I，但M552V在治療后成為優(yōu)勢株。至治療52周，4例YMDD突變患者中的2例發(fā)生血清HBV DNA和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）反跳。第5例患者曾出現(xiàn)ALT反跳，但仍未檢測到HBV DNA。

Zhang博士等認(rèn)為，患者在拉米夫定治療前即出現(xiàn)HBV聚合酶YMDD基序突變株，提示抗病毒治療造成了耐藥株的快速選擇。M552V突變株的復(fù)制能力強(qiáng)于M552I突變株。


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