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丙型肝炎病毒核心蛋白誘導(dǎo)人膽管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化及成瘤實(shí)驗(yàn) 【?2005-06-29 發(fā)布?】 臨床報(bào)道
(廣州)為了探討丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)對(duì)人膽管上皮細(xì)胞(BEC)的轉(zhuǎn)化及致癌作用,研究者通過脂質(zhì)體介導(dǎo)將含有HCV-C基因重組真核表達(dá)載體pcDNA HCV-C導(dǎo)入BEC細(xì)胞,G418篩選表達(dá)目的基因的細(xì)胞;聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)及免疫組織化學(xué)SABC法檢測細(xì)胞中HCV-C 基因及蛋白的表達(dá);細(xì)胞計(jì)數(shù)、錨著非依賴性生長實(shí)驗(yàn)、成瘤性檢測等鑒定其生物學(xué)行為變化,免疫組織化學(xué)SABC法檢測所致腫瘤組織中HCV-C蛋白表達(dá)。結(jié)果 HCV-C轉(zhuǎn)染的BEC 細(xì)胞中HCV-C蛋白表達(dá)于胞質(zhì),質(zhì)粒pcDNA HCV-C轉(zhuǎn)染細(xì)胞的倍增時(shí)間較pcDNA3轉(zhuǎn)染細(xì)胞和未轉(zhuǎn)染BEC細(xì)胞明顯縮短(分別為14 h,28 h,30 h)。pcDNA HCV-C和pcDNA3轉(zhuǎn)染細(xì)胞及未轉(zhuǎn)染BEC在軟瓊脂中的克隆形成率分別為36.0%、2.5%和1.5% (P<0.01)。3種細(xì)胞接種裸鼠后,pcDNA HCV-C轉(zhuǎn)染細(xì)胞注射組出現(xiàn)腫瘤,病理學(xué)檢查證實(shí)為膽管細(xì)胞癌,腫瘤組織有HCV-C蛋白的表達(dá)。而pcDNA3轉(zhuǎn)染細(xì)胞及未轉(zhuǎn)染BEC細(xì)胞注射組在注射36 d后仍未見腫瘤發(fā)生。可見 HCV-C 蛋白具有促膽管細(xì)胞轉(zhuǎn)化和促進(jìn)腫瘤發(fā)生的作用。/**/
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