（南京）為了探討中波紫外線(UVB)輻射角質(zhì)形成細(xì)胞后，UVB輻射劑量與角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡時相的相關(guān)性，研究者以20，40，60，80，100和120 mJ/cm2的UVB輻射永生化人角質(zhì)形成細(xì)胞株HaCaT細(xì)胞，檢測輻射后2，12，24，48和72 h的細(xì)胞活性和細(xì)胞周期的變化，以及代表不同時相的凋亡通路：即應(yīng)用廣譜Caspase抑制劑VAD-FMK與凋亡細(xì)胞中活化的Caspase不可逆的結(jié)合檢測早期Caspase介導(dǎo)的凋亡；應(yīng)用Annexin V及PI雙染方法檢測后發(fā)的細(xì)胞膜介導(dǎo)的凋亡；以及應(yīng)用DNA的梯度凝膠電泳檢測晚期細(xì)胞核介導(dǎo)的凋亡。結(jié)果 UVB輻射可使HaCaT細(xì)胞的細(xì)胞周期受滯于G2/M期，G2/M期的百分比與輻射劑量成正比。細(xì)胞活性于24 h后與輻射劑量成反比。各時相的凋亡率均與輻射劑量成正比，但凋亡通路有明顯的時相性：即早期(48 h內(nèi))由Caspase和細(xì)胞膜介導(dǎo)凋亡為主，晚期(48 h后)則由細(xì)胞核介導(dǎo)凋亡為主。可見 UVB誘導(dǎo)的角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡具有顯著的劑量與時相依賴性特征，宜對其進(jìn)行多指標(biāo)、多時相的檢測。/**/