（上海）為了篩選人源肝癌組織特異性結(jié)合短肽。研究者體外培養(yǎng)人源肝癌細(xì)胞株BEL-7402，建立荷瘤裸鼠模型。尾靜脈注射噬菌體12肽文庫至荷瘤裸鼠體內(nèi)，循環(huán)20 min后回收腫瘤組織中噬菌體，同時(shí)取正常對照組織進(jìn)行噬菌體效價(jià)測定和免疫組化觀察。將回收的噬菌體擴(kuò)增、純化，并以此作為起始物進(jìn)行下一輪篩選。經(jīng)過3輪體內(nèi)篩選，得到與肝癌組織或細(xì)胞特異結(jié)合的肽段。隨機(jī)挑選噬菌體單克隆進(jìn)行測序，分析序列同源性后進(jìn)行體外細(xì)胞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和體內(nèi)回輸實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證噬菌體克隆的導(dǎo)向性。結(jié)果經(jīng)過3輪體內(nèi)篩選，瘤組織中噬菌體的回收率逐步提高，回收量隨著輸入量的增加迅速增加，而每輪篩選肝組織中的噬菌體回收量始終保持在一個(gè)恒定范圍，并不隨輸入量的增加而增加。免疫組化結(jié)果顯示，第3輪篩選后，瘤組織中的噬菌體得到高水平富集，同時(shí)其他組織的非特異性結(jié)合降至最低。肝癌細(xì)胞特異性結(jié)合最強(qiáng)的是A54號單克隆，A67、B2號單克隆次之。B2的導(dǎo)向效果最好，A54次之。通過對噬菌體單克隆的序列分析，初步確定了PSS/PTT基序。可見利用體內(nèi)噬菌體展示技術(shù)，可以成功篩選到與肝癌細(xì)胞或組織特異結(jié)合的噬菌體肽。/**/