(武漢)為了研究抑癌基因PTEN對(duì)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞失巢凋亡的影響并探討其可能的機(jī)制,研究者 A將攜有野生型PTEN基因及無(wú)磷酸活性的突變型C124A-PTEN基因的真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)染SMMC-7721細(xì)胞,利用Western印跡雜交法,檢測(cè)PTEN蛋白表達(dá)與蛋白激酶B(PKB/Akt)、焦點(diǎn)黏附激酶(FAK)磷酸化水平的變化,并應(yīng)用流式細(xì)胞儀技術(shù)和激光共聚焦顯微鏡技術(shù),分析各種細(xì)胞在黏附與失黏附狀態(tài)下的凋亡。結(jié)果與對(duì)照細(xì)胞相比,轉(zhuǎn)染野生型PTEN的SMMC-7721細(xì)胞中,F(xiàn)AK和Akt的磷酸化水平分別降低了65.2%和89.1%,且失巢凋亡率由9.5%增至31.3%;而轉(zhuǎn)染C124A-PTEN的SMMC-7721細(xì)胞中,F(xiàn)AK和Akt的磷酸化水平及失巢凋亡率均無(wú)明顯變化??梢?jiàn)抑癌基因PTEN可依賴其磷酸酶活性抑制FAK和Akt /**/