該項(xiàng)研究目的是觀察磷脂酰肌醇3激酶（PI-3K）抑制劑――沃曼青霉素（wortmannin）誘導(dǎo)豬卵巢顆粒細(xì)胞胰島素抵抗（IR）后，其信號(hào)傳導(dǎo)通路中葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4（GLUT4）、絲裂原激活蛋白激酶（MAPK）基因表達(dá)的變化。方法采用豬卵巢顆粒細(xì)胞體外培養(yǎng)，分別以濃度為0、1．0、1．5、3．0、5．0μmol／L的wortmannin作用48h后，以氚標(biāo)記葡萄糖法及葡萄糖氧化酶法檢測(cè)細(xì)胞的葡萄糖消耗量，以免疫熒光法分析GLUT4、MAPK蛋白定位表達(dá)情況，以RT-PCR方法對(duì)GLUT4、MAPK的mRNA進(jìn)行半定量分析。結(jié)果濃度為1．5μmol／L的wortmannin降低細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取量最高達(dá)40％（P〈0.05），殘余葡萄糖含量增多約13．76％，出現(xiàn)明顯的IR。免疫熒光法結(jié)果顯示GLUT4、MAPK蛋白主要在細(xì)胞質(zhì)表達(dá)。RT-PCR結(jié)果提示，GLUT4基因表達(dá)水平降低21．06％，MAPK表達(dá)水平升高56．43％。由此得出結(jié)論wortmannin可干擾細(xì)胞內(nèi)的糖代謝信號(hào)傳導(dǎo)通路，誘導(dǎo)IR的發(fā)生；同時(shí)可放大有絲分裂信號(hào)傳導(dǎo)通路。/**/